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miR-124抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL27細(xì)胞的增殖活性及其對EZH2的靶向調(diào)控

2016-03-17 來源:健客網(wǎng)社區(qū)  標(biāo)簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:研究指出,miR-124的過表達能夠顯著抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL27細(xì)胞的增殖,并且與EZH2之間存在具有良好的靶向關(guān)系。

  近期,天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院口腔科研究人員發(fā)表論文,旨在探討miR-124對口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL27細(xì)胞增殖活性的影響以及其與EZH2的靶向關(guān)系。研究指出,miR-124的過表達能夠顯著抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL27細(xì)胞的增殖,并且與EZH2之間存在具有良好的靶向關(guān)系。該文發(fā)表在2015年第07期《口腔醫(yī)學(xué)研究》雜志上。

  構(gòu)建pre-miR-124、野生型EZH2(EZH2-WT)和突變型EZH2(EZH2-MT)真核表達載體,采用熒光實時定量PCR(qRT-PCR)檢測pre-miR-124的轉(zhuǎn)染效率,MTT法檢測miR-124過表達對CAL27細(xì)胞增殖活性的影響;另外,利用雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)、qRT-PCR和Westernblot驗證miR-124與EZH2的靶向關(guān)系。

  采用NCBIBLAST軟件比對載體測序,結(jié)果顯示pcDNATM6.2-GW-pre-miR-124、pmirGLO-EZH2-WT和pmirGLO-EZH2-MT表達載體構(gòu)建成功,qRT-PCR顯示轉(zhuǎn)染pre-miR-124后CAL27細(xì)胞內(nèi)miR-124的表達水平顯著升高(P<0.001)。MTT分析結(jié)果顯示miR-124過表達能夠明顯抑制CAL27細(xì)胞的增殖活性(P<0.05),雙光素酶報告基因顯示共轉(zhuǎn)染pre-miR-124和EZH2-WT的CAL27細(xì)胞熒光活性顯著下降(P<0.001),且qRT-PCR的結(jié)果也顯示轉(zhuǎn)染pre-miR-124的CAL27細(xì)胞內(nèi)EZH2的表達水平明顯低于對照組(P<0.001),Westernblot顯示miR-124的過表達能夠顯著抑制EZH2蛋白水平的表達。

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