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獲得性血友病

獲得性血友病 的檢查:

羊水細胞性染色質(zhì)檢查 漿膜腔積液 姐妹染色單體互換 血小板檢查項目 簡易凝血活酶生成糾正試驗

1.激活的部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)和血小板功能檢查 當(dāng)APTT延長、PT和血小板功能正常時應(yīng)考慮有無自身抗體存在,是檢查自身抗體的篩選試驗。
2.血漿混合試驗 當(dāng)僅有APTT延長時,應(yīng)進行血漿混合試驗測定APTT以確定抗體的存在。如APTT仍延長5s或以上為抗體存在。當(dāng)內(nèi)凝血途徑某一因子(FⅫ、FⅪ、FⅨ、FⅧ)缺乏時,正常血漿與患者血漿等量混合可糾正延長的APTT;但是,當(dāng)有抗體存在時,等量血漿混合后延長的APTT、不能得到糾正。對于低滴度抗體,需將患者血漿與正常血漿在37℃共同孵育1~2h,以增強自身抗體對FⅧ的作用(以時間和溫度依賴的方式)。因為高滴度的FⅧ自身抗體能非特異性地抑制內(nèi)凝途徑中的凝血因子(FⅨ、FⅪ、FⅫ),所以需要把患者血漿系列稀釋并與未稀釋的正常血漿混合進行試驗。由于抗體被稀釋,F(xiàn)Ⅻ、FⅪ、FⅨ的活性正常,而FⅧ:C仍被抑制。
3.Bethesda試驗 一旦確定存在自身抗體,就應(yīng)對抗體進行定量以評估出血的嚴重程度和危險性。常用的方法是Bethesda法,即檢測患者血漿滅活正常血漿中FⅧ的能力。一個Bethesda單位定義為檢測體系中剩余FⅧ活性為50%時的患者血漿稀釋度。但是,該方法缺乏敏感性尤其是當(dāng)抗體為低滴度時。此外,Bethesda法是為檢測在HA患者中出現(xiàn)的同種抗體而建立的,用于AH患者檢測自身抗體不是一個理想的方法。但是,用此法進行自身抗體的定量對低滴度自身抗體患者出血的嚴重性仍有預(yù)測作用。
4.改良Bethesda試驗 即將患者血漿與緩沖液稀釋后的正常人血漿共同溫育以保證體系pH值的恒定,同時將緩沖液稀釋后的正常人血漿與乏FⅧ血漿一起溫育作為對照。改良法提高了敏感性,尤其適合用于低滴度抗體的檢測。因此,被推薦為檢測抑制性抗體的首選方法。但是,與Bethesda法一樣,該法不能檢測非抑制性FⅧ抗體,所用的缺如FⅧ的血漿中不應(yīng)有FⅧ抗體;同時對照和混合的血漿應(yīng)是同一來源。
5.ELISA法 用重組FⅧ包被,4℃過夜;魚膠封閉非特異性位點,加入經(jīng)稀釋的患者血漿并37℃孵育;再加入辣根過氧化物酶標記的兔抗人IgG,四甲基二氫氯化聯(lián)苯胺(TMB)作為發(fā)色底物,鹽酸終止反應(yīng),450nm處測吸光度(A)。該方法能檢測所有抗FⅧ抗體,包括抑制性和非抑制性的自身抗體和同種抗體。其敏感性是Bethesda法的10倍。但是,該法在檢測時用作標準抗原的FⅧ來源對抗體檢出的敏感性有很大影響,用重組FⅧ做抗原時檢出率最高;用血漿來源的FⅧ因含高水平的血管性血友病因子(vWF),檢出率最低。所以臨床上在檢測FⅧ抗體時應(yīng)用重組FⅧ做抗原。
6.免疫沉淀法(IP) 患者稀釋血漿與125I標記的FⅧ分子的A1、A2、C2、輕鏈片段共同孵育后,再加入蛋白G-sephrose結(jié)合的磁珠;用γ計數(shù)儀測定結(jié)合的放射活性;結(jié)果表示為免疫沉淀單位/ml,計算公式為:1-(結(jié)合放射活性/總放射活性一背景放射活性)×血漿稀釋倍數(shù)×16.7。該方法的敏感性和特異性與ELISA相同,也能檢測所有抗FⅧ抗體,包括抑制性和非抑制性的自身抗體和同種抗體。臨床上,在檢測FⅧ抗體時應(yīng)同時進行Bethesda和ELISA法或IP法檢測。
7.FⅧ:C檢測 一期法不能判定FⅧ:C減低是因FⅧ自身抗體還是狼瘡抗凝物質(zhì)引起。二期法則可鑒別,因在狼瘡抗凝物質(zhì)存在時FⅧ:C水平正?;蛏踔猎黾?也可用血小板中和試驗或稀釋的RVVT來鑒別。
根據(jù)病情,臨床表現(xiàn)、癥狀、體征選擇做心電圖、B超、X線、CT、MRI、生化等檢查。

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