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改造型Cas9:RNA病毒的新殺器?

2015-05-14 來(lái)源:健客網(wǎng)社區(qū)  標(biāo)簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護(hù)膚
摘要:《美國(guó)科學(xué)院院刊》近期發(fā)表了一篇關(guān)于改造Cas9系統(tǒng)的文章。來(lái)自一種革蘭氏陰性細(xì)菌(Francisellanovicida)的FnCas9能夠通過(guò)重編程后(即改變引導(dǎo)RNA的序列),能夠結(jié)合到在真核生物細(xì)胞中特異性的RNA靶標(biāo)上去。

  Cas9是一種特殊的核酸內(nèi)切酶,已經(jīng)迅速成為了基因組編輯時(shí)代的革命性的新工具。通過(guò)小的RNA作為引導(dǎo)序列,Cas9能夠特異性結(jié)合到DNA上我們感興趣的區(qū)域,然后切割DNA雙鏈。

  《美國(guó)科學(xué)院院刊》近期發(fā)表了一篇關(guān)于改造Cas9系統(tǒng)的文章。來(lái)自一種革蘭氏陰性細(xì)菌(Francisellanovicida)的FnCas9能夠通過(guò)重編程后(即改變引導(dǎo)RNA的序列),能夠結(jié)合到在真核生物細(xì)胞中特異性的RNA靶標(biāo)上去。這個(gè)FnCas9與其他類型的cas9不同,前者可以結(jié)合到細(xì)菌中的成熟信使RNA上并有RNA切割酶的功能。這些FnCas9針對(duì)的RNA包括單鏈RNA病毒(丙肝病毒)的基因組RNA。這種針對(duì)病毒RNA的FnCas9系統(tǒng)的定向可以導(dǎo)致病毒蛋白質(zhì)合成受阻。

  首先他們合成了一段被叫做rgRNA的引導(dǎo)RNA。這種RNA和細(xì)菌中存在的某些RNA結(jié)構(gòu)很相似。這個(gè)rgRNA有一段雙鏈區(qū),是FnCas9的結(jié)合位點(diǎn);還有一段單鏈區(qū),可以和丙型肝炎病毒的單鏈RNA基因組5‘端的一段保守區(qū)域互補(bǔ)形成雙鏈。丙肝病毒這段保守區(qū)的RNA被認(rèn)為對(duì)于病毒的蛋白質(zhì)翻譯和核酸復(fù)制有重要作用。然后他們將帶有rgRNA對(duì)應(yīng)的DNA序列整合進(jìn)質(zhì)粒,和攜帶FnCas9系統(tǒng)的質(zhì)粒一起轉(zhuǎn)進(jìn)真核細(xì)胞。通過(guò)檢查發(fā)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)組中病毒蛋白質(zhì)翻譯明顯減少。同時(shí),病毒的核酸復(fù)制量也被抑制了。

  科研工作者們還比較了FnCas9靶向切割RNA和Cas9靶向DNA的差異。他們發(fā)現(xiàn),F(xiàn)nCas9結(jié)合到RNA不需要Cas9所必須的切割位點(diǎn)連接區(qū)PAM。

  隨著研究的深入,未來(lái),我們或許可以設(shè)計(jì)針對(duì)RNA病毒的FnCas9系統(tǒng),定向結(jié)合到病毒RNA并抑制病毒的復(fù)制。這種方法能夠非常特異性地識(shí)別病毒RNA,從而或許將成為針對(duì)RNA病毒的精確制導(dǎo)炸彈??删幊痰腇nCas9系統(tǒng)可以一方面成為針對(duì)RNA病毒治療的方法,同時(shí),也可能為真核生物中的RNA的編輯打開(kāi)了新的大門。

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