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血清補體溶解免疫復合物活性

血清補體溶解免疫復合物活性概述

在補體的CRA中,旁路激活途徑(AP)起主導作用,傳統(tǒng)激活途徑僅為促進作用。補體CRA的機制是,在補體與IC相互作用時,AP的C3轉化酶大量裂解C3,形成的大量C3b嵌入到抗原抗體的格子狀結構中并牢固與抗體結合,使部分抗原抗體的結合鍵斷裂,較大的IC凝聚物變?yōu)檩^小的凝聚物,從而溶解于液相中。 

血清補體溶解免疫復合物活性正常值

  • (1)酶-抗酶法:正常人CRA(X±SD)為0.38±0.12,正常參考范圍可以為X±2SD即0.14-0.62?!?br /> (2)放射免疫法:成人溶解率正常值為66.0±7.4%。 

血清補體溶解免疫復合物活性臨床意義

  • 患自身免疫病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎、慢性活動性肝炎、腎小球腎炎等,補體裂解復合物的能力低下。補體系統(tǒng)正??煞乐共±硇訧C的出現(xiàn)或使IC激活補體引起的炎癥損傷減輕。而補體的先天或后天缺陷及補體系統(tǒng)的激活受阻可能是病理性IC出現(xiàn)的重要原因。 

血清補體溶解免疫復合物活性檢查方法

  • (1)酶-抗酶法:
    ①取HRP-抗HRP復合物0.2ml,加待測血清0.1ml,置尖底離心管,于37℃水浴1h,時時搖動混勻。
    ②加入PBS 1ml,3000r/min,離心15min。
    ③取上清0.5ml加底物溶液0.4ml,37℃ 1h呈色。加1mol/L NaOH 0.1ml終止反應,再加入PBS 3ml,測450nm吸光度。
    ④用PBS 0.1ml代替待測血清作為對照管調零。
    (2)放射免疫法:
    ①試驗組:
    A.用含Ca2+、Mg2+明膠巴比妥緩沖液1∶3稀釋待測血清45μ1,125I BSA-抗BSA復合物懸液5μl 37℃ 15min加冷PBS(pH7.2 0.15mol/L)1ml。
    B.1800r/min離心20min,棄上清,用γ-閃爍計數儀測沉淀cpm。
    ②對照組:自然溶解,正常人混合血清56℃滅活30min取45μl。
    正常溶解:正常人混合新鮮血清,取45μl。對照組所加其他試劑同實驗組。 

血清補體溶解免疫復合物活性注意事項

  • 酶-抗酶法:
    (1)補體并非對所有抗原抗體復合物都溶解,只能溶解可溶性抗原(多糖、蛋白、半抗原等)形成的IC。
    (2)其他注意事項同酶免疫技術節(jié)。 

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