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甲型肝炎抗原

甲型肝炎抗原概述

甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)為一直徑為27~32nm的二十面體立體對稱圓球形顆粒,無包膜,核心為單鏈正股RNA。HAV屬小RNA病毒科嗜肝病毒屬(hepatovirus)或嗜肝RNA病毒屬(heparnavirus)。HAV主要通過手-口途徑傳播,潛伏期15~50天,平均28天。病毒常在患者血清ALT升高前的5~6天就存在于患者的血液和糞便中。發(fā)病2~3周后,隨血清中特異抗體的產(chǎn)生,血清和糞便的傳染性就逐漸消失。HAV的實驗室診斷可進(jìn)行抗原檢測。

甲型肝炎抗原正常值

  • 陰性。

甲型肝炎抗原臨床意義

  • HAVAg存在于病人感染后10~20d的糞便中,一般在發(fā)病前1~15d從糞便中排出,臨床上不易捕捉到。發(fā)病1周時陽性率42.9%,1~2周時為18.3%,半個月后消失。因此,臨床上較少用。如果HAVAg陽性,表示病人正在感染甲肝,為急性期早期。

甲型肝炎抗原檢查方法

  • 1、甲型肝炎抗原的測定原理
    夾心ELISA法,即包被抗-HAV,加待檢血清,再加酶標(biāo)記抗-HAV,加底物顯色,酶標(biāo)儀測定OD值。若用硝酸纖維素膜(NC)代替聚苯乙烯板,即NG-EIA法,抗原的檢測可得到加強(qiáng),能檢測到1ng的HAV蛋白,相當(dāng)于1.5×104病毒顆粒。
    2、試劑
    國內(nèi)有商品化試劑盒供應(yīng),內(nèi)含抗μ鏈包被的反應(yīng)板(條),HAV應(yīng)用液,抗HAV-HRP標(biāo)記物,以及抗HAV IgM陰、陽性對照血清,樣品稀釋液,洗滌液,底物液及終止液等試劑。
    3、操作方法
    應(yīng)按試劑盒說明書進(jìn)行檢測。一般試劑盒分兩類。
    (1)三步法:本法操作步驟較多,檢測費(fèi)時,有逐漸被二步法取代的趨勢。
    ①加稀釋樣品:在包被反應(yīng)板(條)孔內(nèi)加入1∶1000倍稀釋樣品100μl,每次實驗有陰、陽性對照,37℃保溫2h,洗板3次。
    ②加HAV:各孔加HAV 100μl,37℃ 1h后移至4℃過夜,洗板3次。
    ③加抗HAV-HRP:各孔加抗HAV-HRP 100μl,37℃保溫3h,洗板4次。
    ④顯色:各孔加入底物液100μl,37℃保溫15min。
    ⑤終止反應(yīng):各孔加入終止液50μl。
    ⑥結(jié)果判讀。
    目測法:無色或略帶淡黃色為陰性,橘黃色為陽性。
    比色法:在酶標(biāo)儀上以試劑空白校零點(diǎn),測各孔在492nm光密度值,當(dāng)樣品A值/陰性對照A值大于或等于4為陽性,低于4為陰性。
    (2)二步法操作:按上法加稀釋樣品保溫、洗滌后,同時各孔加HAV 50μl及抗HAV-HRP 50μl,混勻后37℃保溫1h,洗板4次,以后同上法顯色和判讀結(jié)果。 

甲型肝炎抗原注意事項

  • 檢查前:不隨便亂吃東西,特別是含又酒精和油膩的東西。
    檢查時:放松身心。 

甲型肝炎抗原相關(guān)問答

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